碳-碳环合酶及其编码基因与应用

本发明涉及一种来源于真菌的碳‑碳环合酶，其制备方法、基因克隆、表达及用于韧革菌素类化合物的制备。本发明的碳‑碳环合酶是将真菌褐盖韧革菌(Boreostereum vibrans)的菌丝匀浆上清液经过硫酸铵沉淀、离子交换层析等步骤制备而得。该酶是由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质，和将序列表中序列2的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加的由1)衍生的蛋白质。将该蛋白的编码基因导入大肠杆菌后构成的重组大肠杆菌。利用碳‑碳环合酶及重组大肠杆菌所产蛋白作为生物催化剂，在温和条件下迅速催化氧杂环庚三烯‑2(3H)‑酮发生分子内碳‑碳环合形成具有4/5融合双环内酯骨架的韧革菌素类化合物，为这类活性分子的合成提供一种新途径。